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Oita Medical University Hospital
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微生物検査室
《 概要 》
一般に微生物検査では、起炎菌を決定し、その菌に対する薬剤の感受性を測定するために、最低4日（当日を含む）を要しています。また、嫌気性菌・真菌などはさらに多くの培養日数を要し、臨床サイドでは微生物検査の結果を待たずして治療にはいることが少なくありません。
一方、抗酸菌の結果報告はかつて1ヶ月を要していましたが、遺伝子検査（PCR）の導入により検体を提出して翌々日には結核菌の検出が可能となりました。
今後、一日でも早く検査結果が報告できるよう、抗酸菌以外の菌についても、遺伝子を用いた方法など検討しつつ、菌の同定、耐性菌の検出に向け努力していきたいと思います。
また、薬剤耐性菌の問題は、MRSAに限らず多剤耐性緑膿菌による院内感染がマスコミで取り沙汰され表面化してきています。感染制御部と連携をとりながら院内感染防御に貢献できるよう努めたいと考えています。
微生物とは・・・
肉眼では判別することはできませんが、顕微鏡で拡大することで観察できる大きさの生物です。細菌、ウイルス、真菌などが含まれます。具体的には、近年話題となった 大腸菌O
−157、MRSA、多剤耐性緑膿菌、結核菌 などがあります。
大腸菌 |
緑膿菌 |
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微生物検査の目的について・・・
食中毒による下痢や嘔吐、呼吸器疾患（せき、のどの痛み、肺炎など）、化膿といった感染症や日和見感染の原因となる病原微生物を見つけ出すことが主な目的です。また、術前や入院時の菌保有状態を調べるために行われています。
検査材料について・・・
喀痰、咽頭拭い液、糞便、尿、血液、組織などの感染の強く疑われる部位からと採取したものを検査材料として用いています
検査について・・・
はじめに、微生物はヒトの皮膚、空気中、床や机の上などのありとあらゆる場所に生息しています。そういった環境中に生息する微生物が検査材料に混在するのを防ぐために、作業の大半を安全キャビネット中で行っています。また、作業を行う私たちも常に使い捨てのマスクや手袋を着用しています。
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安全キャビネット |
一般細菌検査について・・・
一般細菌とは，特定培地（標準寒天培地）を用いて３６±１℃・２４±２時間
での条件下にて培養したときに培地上で増殖する細菌に対する名称のことです。
特定の細菌またはグル−プを指すものではありません。
一般細菌検査の流れ
＊ 上記図の提出から報告までに３日〜４日の日数を要します。
（塗抹染色）
グラム染色という方法を用いています。染色を行うことにより、検査材料中の
細菌の有無や菌量などが分かり、また菌の大まかな分類も可能となります。
検査材料に応じて色々な培地に材料を塗り広げていき、その培地を孵卵器（３６℃）の中で約２０時間培養します。材料中に細菌が存在していた場合には、培地の表面にコロニーと呼ばれる菌の塊が生えてきます。
（同定検査）
コロニーの色・つや・形といった肉眼的な性状、生化学的な検査、同定キットによる検査などを行うことにより、菌名が決定づけられます。
（薬剤感受性検査）
感染症を引き起こす原因となった細菌に対して、どの様な抗生物質が効果的かを調べる検査です。
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染色像（グラム陽性レンサ球菌） |
染色像（グラム陰性桿菌） |
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生化学検査用培地 |
同定キット |
嫌気性菌について・・・
酸素濃度０％、炭酸ガス濃度２１％の酸素の存在しない環境下で発育良好な細菌の検査です。
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嫌気培養装置 |
微好気性菌について・・・
酸素濃度２〜１０％の環境下で発育良好な細菌の検査です。代表的な菌としては、胃潰瘍の原因となるピロリ菌や胃腸炎の原因となるキャンピロバクターといった菌があります。
抗酸菌検査について・・・
抗酸菌は大まかに結核菌と非定型抗酸菌とに分類されます。症状としてはどちらとも咳、痰、全身倦怠感、微熱といった状態が長期に渡って続きます。しかし、結核菌はヒトからヒトへ感染し、ヒトの体内でしか生息できないのに対して、非定型抗酸菌は環境中に生息しており、ヒトからヒトへの感染はほとんど無いと言われています。
抗酸菌は一般細菌に比べ発育が非常に遅い為に、以前は菌名が同定されるまでには１ヶ月から２ヶ月程の期間を要していました。しかし近年、遺伝子検査が導入されるようになってからは、結核菌などの一部のものに関しては２日から３日で同定できるようになりました。結核というと過去の病という風に思われがちですが、決してそうではなく、沈静化していません。むしろ近年では増加の傾向にあります。疑わしい症状の方は早めに近医に罹られることをお薦めします。
好酸菌検査の流れ
（塗抹染色）
蛍光染色、チール・ネルゼン染色という２種類の方法を用いています
（検体処理）
NALC(N-アセチル-L-システイン)-NaOH法により、抗酸菌以外の菌を除きます。
（分離培養）
卵培地、液体培地を用いています。
（遺伝子検査）
結核菌（Mycobacterium tuberculosis）／M.avium ／M.intracellulareの３菌種の同定が可能です。
（同定検査）
DDH（DNA−DNA−ハイブリダイゼーション）法により同定検査を行っています。
（感受性検査）
感染症を引き起こす原因となった好酸菌に対して、どの様な抗生物質が効果的かを調べる検査です。
真菌検査について・・・
自然界には数万種も真菌が生息していると言われています。水場や食べ物に生えるカビも真菌の一種ですし、パンやお酒を作る際に用いられる酵母も真菌の一種です。そういったことからも、真菌は身近に感じることのできる微生物ではないでしょうか？
ほとんどの真菌はヒトに害を及ぼすことはありませんが、ごく一部の菌は感染症を引き起こします。また、普段は無害であっても免疫力が低下している場合には感染症を引き起こすこともあります。
真菌感染症としては、皮膚の表面や爪などに感染する（俗にいう水虫）浅在性真菌症と組織や臓器などの体内に病変を形成する深在性真菌症があります。
特殊細菌検査について・・・
当検査室では検査の迅速化を目的として、キット化された試薬を用いています。
- 血清カンジダ抗原検査
血清中のカンジダ抗原の抗体価を測定する検査です。 - A群溶連菌検査
小児の咽頭炎の原因菌であるA群溶連菌の検査です。 - ロタウイルス検査
冬期において乳幼児の下痢を起こすウイルスの検査です。 - クロストリジウム ディフィシレ 毒素検査
偽膜性腸炎の原因となるクロストリジウム ディフィシレの産生する毒素の検査です。 - 髄液迅速検査
随液中の髄膜炎菌、肺炎球菌、インフルエンザ菌、の有無を調べる検査です。 - 尿中肺炎球菌／レジオネラ検査
肺炎の原因菌である肺炎球菌／レジオネラ菌の検査です。